광도 분석에서 참조 용액의 역할은 무엇입니까?
1. 원리
특정 물질의 가시광선과 자외선 조사는 주로 물질 분자의 원자가 전자 에너지 준위의 전이에 의한 방사선 흡수로 인해 발생합니다. 화합물의 자외선 흡수 스펙트럼. 분광광도법이나 흡수분광법의 분석법은 물질이 빛을 선택적으로 흡수하는 것에 기초하여 확립됩니다. 이는 Lambert-Beer의 법칙을 기반으로 합니다.
1
Lambert-Beer의 법칙 A = lg—- = ECL
T
여기서 A는 흡수입니다. >
T는 빛의 투과율이고,
E는 흡수계수로 (E1%1cm)로 표현되는데, 물리적 의미는 용액 농도가 1%(g/ml)일 때의 의미입니다. , 액체층 두께가 1cm일 때의 흡광도 값;
C는 용액 100ml에 함유된 측정 물질의 무게(건조물 또는 무수물로 계산), g;
L은 액체층의 두께(cm)입니다.
2. 사용 범위
방향족 고리 또는 ***-요크 이중 결합 구조를 가진 모든 유기 화합물은 특정 흡광도에서 측정된 흡광도를 기준으로 의약품에 사용될 수 있습니다. 파장 식별, 순도 검사 및 함량 결정.
3. 기기
가시광선-UV 분광 광도계. 적용 파장 범위는 200~400nm의 자외선 영역과 400~850nm의 가시광선 영역이다. 주로 방사선원(광원), 분산 시스템, 검출 시스템, 흡수 셀, 데이터 프로세서, 자동 기록 장치 및 디스플레이로 구성됩니다.
이 장비는 상대 측정 원리에 따라 작동합니다. 즉, 먼저 특정 용매(또는 공기, 시료)를 표준(공백 또는 참조) 용액으로 선택하고 빛 투과도를 고려합니다. 100%(또는 흡광도는 0)이며, 테스트 샘플의 빛 투과율(또는 흡광도)은 실제로 표준 용액에 대한 상대적인 비율이며, 이는 각각 테스트 샘플을 통과하는 출구 슬릿에서 방출됩니다. 시료와 표준 용액 사이의 두 가지 빛 에너지 중 특정 파장에서 테스트되는 시료의 투과도(또는 흡광도)가 됩니다.
이 장비는 방향족 고리 또는 ***-요크 이중 결합 구조를 가진 유기 화합물, 유색 물질 또는 특정 시약과 반응하여 적절한 조건에서 유색 물질을 생성할 수 있는 물질을 정확하게 측정할 수 있습니다.
사용하기 전에 측정 파장을 보정해야 하며 기기 지침에 따라 작업을 수행해야 합니다.
IV. 장비 교정
1. 파장 정확도 테스트
장비에 표시되는 파장 값과 단색광의 실제 파장 값 사이의 오차 ±1.0nm 범위 내에 있어야 함을 나타냅니다.
장비에 있는 중수소 램프의 486.02nm 및 656.10nm 스펙트럼 선을 교정에 사용할 수 있습니다.
2. 흡광도 정확도 테스트
3. 미광 테스트
4. 파장 재현성 테스트
5 .해상도 테스트
V. 판정방법
1. 기준물질 비교방법
(1) 품종별 시험방법에 따라 시험성분 함유량을 별도로 준비한다. 표준액의 함량은 시험액의 표시량의 100 ± 10%이어야 하며, 사용하는 용매도 표준액의 흡광도를 계산한 후 정확히 동일해야 합니다. 용액과 대조액을 혼합하여 다음 식에 따라 함량을 계산한다.
(2) 계산식
시료 A×G쌍/희석배수×100×1
함량(%) = ——————— ——————--×100%
한쌍×G 시료/희석배수×100×1
2. 흡수계수법
( 1) 품종별 방법에 따라 검액을 조제하고, 규정 파장에서의 흡광도를 측정한 후, 규정 조건 하에서 품종의 흡광계수를 기준으로 함량을 계산한다. 이 방법으로 측정할 때는 기기의 교정 및 검증에 주의를 기울여야 합니다.
(2) 계산식
샘플 A
함량(%) = ——————————————- ×100 %
G 시료/희석배수 × (E1% 1cm) 대 주의. 이 방법에는 여러 종류가 있으며, 각 종류에 명시된 방법에 따라 사용해야 합니다. 흡광도 곡선이 급격하게 상승하거나 하강하면서 흡광도를 측정하는 경우, 파장의 작은 변화도 측정 결과에 큰 영향을 미칠 수 있으므로 기준물질과 시험 시료의 시험조건은 최대한 일관되게 유지해야 합니다. 비타민 A 측정과 같이 측정 중에 기준 물질을 사용하지 않는 경우 측정 중에 기기를 신중하게 교정하고 교정해야 합니다.
VI. 주의사항
1. 공시액과 검액은 맑고 탁하지 않아야 한다. 혼탁한 경우 미리 여과하고 초기여액은 폐기한다.
2. 측정 시 별도의 규정이 없는 한 시험용액 조제에 사용한 용매와 동일한 병을 공시험 대조액으로 사용하고, 1cm 석영흡수셀을 사용한다.
3. 규정된 흡수 피크 파장 ±2nm 내의 여러 지점의 흡광도를 테스트하여 시험 제품의 흡수 피크 파장 위치가 올바른지 확인합니다. 별도로 명시하지 않는 한 흡수 피크 파장은 다음 범위 내에 있어야 합니다. 이 카테고리에 지정된 파장은 ±2nm 이내입니다. 그렇지 않으면 샘플의 진위성, 순도 및 장비 파장의 정확도를 고려해야 하며 최대 흡수가 가능한 파장을 측정 파장으로 사용해야 합니다.
4. 일반적으로 검액의 흡광도 판독값은 0.3~0.7 사이의 작은 오차가 있어야 합니다.
5. 흡수 셀은 쌍을 이루어야 합니다. 그렇지 않으면 측정 오류가 발생합니다. 특정 파장에서 투과도 차이가 0.5% 미만인 두 개의 흡수 셀을 쌍으로 만듭니다. 필요한 경우 최종 측정에서 흡수 셀 간의 오류 보정 값을 빼야 합니다.
6. 흡수 셀과 용매 자체가 바탕흡광도를 가질 수 있으므로, 함량을 계산하기 전에 시험 시료의 흡광도에서 바탕값을 뺀 값을 계산해야 합니다.
7. 장비의 접지 상태가 양호해야 하며, 접지에 노출된 모든 부품의 전위가 24V를 초과해서는 안 됩니다(전기 테스트 펜의 네온관이 빛나지 않아야 함).
8. 사용 중에 샘플 챔버 덮개를 열거나 테스트를 일시적으로 중단해야 하는 경우 제때에 라이트 도어 버튼을 눌러(광전관 앞에 있는 라이트 도어를 닫아야 함) 광전관을 보호하십시오. 강한 빛이나 장기간 노출로 인해 광전관이 손상되는 것을 방지하십시오.
9. 측정 중 또는 다른 시험제품으로 변경할 때에는 흡수셀을 측정용액으로 3~4회 헹구고, 흡수셀의 투광면을 깨끗한 실크천이나 천으로 닦아주십시오. 더 이상 보이지 않을 때까지 렌즈 청소용 종이를 사용하십시오. (투명 표면을 착용하지 마십시오.)
10. 흡수풀을 꺼낼 때는 불투명 유리의 양쪽을 잡아야 하며, 기름 얼룩이 생기지 않도록 투명한 부분을 손으로 잡지 마세요. 사용 후 즉시 측정용제로 헹구고 정제수로 헹구고 깨끗한 실크천이나 렌즈 청소용 종이로 건조시킨 후 건조 후 흡수셀 박스에 넣어 방진 보관하십시오.
11. 흡수 풀의 내벽과 외벽이 오염된 경우 두 풀의 차이를 처리해야 합니다.
(1) 편평한 대나무 띠에 명주천을 감거나, 얇은 유리막대에 흡수성 솜을 감아 에탄올에 담근 후 가볍게 문지른 후 정제수로 헹궈내면 됩니다.
(2) 위의 방법으로 효과가 없을 경우 필요에 따라 중크롬산칼륨-황산칼륨 세척액에 1~2분간 담가둔 후 수돗물로 헹군 후 정제수로 헹궈주세요.
(3) 표면 마감이 손상되어 정상적인 사용에 영향을 미칠 수 있으므로 브러시로 문지르거나 딱딱한 물건으로 닦지 마십시오.
12. 실리카겔을 건조한 상태로 유지하십시오. 이는 광학 부품 및 광전 증폭기 시스템이 습기로 인해 손상되어 기기의 정상적인 작동에 영향을 미치지 않도록 보호하는 것입니다. 실리카겔은 파란색에서 분홍색으로 변하므로 즉시 교체해야 합니다. 이 장비에는 두 개의 건조제 카트리지가 있습니다. 하나는 증폭기 카세트에 설치되고 다른 하나는 모노크로메이터 카세트에 설치됩니다.
13. 실리카겔 건조제 교체 시에는 전원을 꺼야 합니다.
14. 가동 중단 기간 동안 봉지에 넣거나 튜브에 넣은 실리카겔 건조제를 호스트 기계의 샘플실에 놓아야 합니다. 장비 전체를 먼지 커버로 덮고 먼지 커버 안에 방습 실리카겔 봉지를 여러 개 넣습니다.
15. 기구를 작동하는 동안 슬릿의 폭은 작은 것에서 큰 것으로 점차 넓어져야 합니다. 슬릿이 너무 크면 광전관에 들어가는 빛 에너지의 과도한 강도로 인해 증폭기의 출력 신호가 포화 상태에 도달하여 디지털 디스플레이가 오버플로됩니다(예: 숫자가 깜박이거나 디스플레이가 변경되지 않음). 이것은 잘못된 악기가 아닙니다.
16. 파장을 625nm로 회전시키고, 0.02nm 근처의 슬릿을 닫은 후, 작동 중지 위치로 돌아가는 버튼을 선택합니다(즉, 버튼 3개가 모두 팝업됩니다).
17. 장비를 이동할 때 장비의 슬릿이나 광학 경로 구성 요소가 손상되는 것을 방지하기 위해 샘플 챔버, 광전관 박스 끝 또는 광원 램프 챔버가 아닌 본체 끝에서 이동해야 합니다. 스트레스로 인해 변형됩니다. 그리고 이동이나 운반 시에는 움직일 수 있는 부분을 고정해야 합니다. 예를 들어 각 손잡이에 테이프를 붙일 수 있으며, 슬릿 위치를 더 넓게 벌린 후 고정해야 합니다. 운송 중 진동.
18. 장비의 격자와 반사경을 닦아서는 안 됩니다. 그렇지 않으면 장비의 광학 표면이 손상되고 미광이 증가합니다.
19. 장비를 이동한 후 시간에 따라 파장 정확도를 확인하고 수정하십시오. 측정의 정확도를 보장하기 위해 자주 파장 정확도를 교정하십시오. 이상이 있을 경우 즉시 품질보증부서에 보고하되, 승인 없이는 조정을 할 수 없으며 적시에 기록을 보관해야 합니다.
7. 결과 계산
A
E1%1cm(테스트 샘플) = ——
CL
E1%1cm(시험시료)
함량(%) = ——————————-×100%
E1%1cm(표준치 또는 기준물질) )
8. 허용편차
특별한 규정이 없는 한 기기분석법의 오차한계는 ±(2.0~3.0)% 이내이어야 한다.
(바이두 블로그에서)